В недавнем исследовании, опубликованном на сервере препринтов bioRxiv *, исследователи изучали различные антигены , на которые нацелены Т-клетки, специфичные для вируса осповакцины (VACV) и вируса оспы обезьян (MPXV).

Фон

Глобальные агентства здравоохранения отслеживают вспышку MPXV в 2022 году на основе опыта пандемии тяжелого острого респираторного синдрома коронавируса 2 (SARS-CoV-2). Это очень важно, потому что в исследованиях почти не изучались качество и продолжительность иммунных ответов, связанных с естественной инфекцией MPXV у людей. Отсутствуют данные об эффективности всех вакцин MPXV, в первую очередь основанных на VACV. Что касается VACV, Т-клетки обеспечивают общий иммунитет против инфекций MPXV. Однако исследования не изучали иммунитет к MPXV, индуцированный инфекцией MPXV, или вопрос о том, является ли клеточный иммунный ответ, индуцированный у людей вакцинацией против VACV, перекрестно-реактивным с эпитопами MPXV.

В предыдущем исследовании авторы продемонстрировали, как пулы большого количества пептидов, мегапулы (МП), полученные путем последовательной лиофилизации, можно использовать для точного измерения кластера дифференцировки (CD)4+ и CD8+ Т-клеточных ответов против сложных антигенов. . MP могут быть пептидами, охватывающими всю последовательность антигена, или экспериментально определенными или предсказанными эпитопами Т-клеток. Хотя этот подход работал для нескольких аллергенов, а также бактериальных и вирусных мишеней, исследования не проверяли и не подтверждали МП для поксвирусов.

Об исследовании

В настоящем исследовании исследователи извлекли информацию об эпитопах вакцин против ВОВ в базе данных иммунных эпитопов (IEDB), чтобы предсказать потенциальные мишени для MPXV, распознаваемые Т-клетками. Они разработали MP на основе наиболее иммунодоминантных белков-ортологов MPXV, которые могут помочь оценить Т-клеточные ответы на VACV и предсказать Т-клеточные эпитопы MPXV, которые, вероятно, будут распознаваться Т-клеточными ответами, индуцированными VACV. Наконец, они подтвердили биологическую активность этих MP путем тестирования мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) из банка субъектов, ранее вакцинированных вакциной Dryvax.

Gaia Herbs, Гриб рейши, 40 веганских капсул

Вакцина VACV, продаваемая как Dryvax, ликвидировала оспу в 1980-х годах. Позже, в 2001 году, из-за риска серьезных реакций и других проблем с безопасностью вакцина Dryvax была снята с производства и заменена модифицированной вакциной на основе вируса осповакцины Анкара (MVA) под торговой маркой JYNNEOS.

Результаты исследования

Анализ данных об эпитопах из IEDB выявил замечательную широту иммунных ответов CD4+ и CD8+ Т-клеток. Авторы отметили, что 19 и 40 открытых рамок считывания (ORF) покрывают 67% и 61% ответов CD4+ и CD8+ Т-клеток соответственно. Это открытие показало, что сосредоточение внимания на более чем 200 ORF, обычно кодируемых в геномах оспы, может помочь зафиксировать большинство ответов Т-клеток, что позволит идентифицировать и определить реагенты мегапула, специфичные для MPXV . Определение доминантных ORF дало представление о механизмах, лежащих в основе развития этих ответов, показав, что доминантные антигены представляют собой преимущественно ранние ORF, обогащенные структурными белками в случае ответов CD4+ Т-клеток, что подтверждает более ранние исследования.

Кроме того, авторы отметили, что MVA сохранил все доминирующие ORF и имел ортологи в MPXV. Опять же, это важный вывод, свидетельствующий о том, что индуцированный MVA Т-клеточный ответ, направленный на MPXV, в идеале должен быть способен отражать ответы, вызванные вакциной VACV, со значительной клинической эффективностью против MPXV у людей.

Через две недели после вакцинации (ранние временные точки) все субъекты продемонстрировали положительный ответ CD4+ T-клеток на пулы предсказанных эпитопов MPXV, но только 63% ответа CD8+ T-клеток. Эти ответы существенно уменьшились в течение пяти-семи месяцев после вакцинации. Проверка пулов эпитопов выявила некоторые новые аспекты ответов Т-клеток человека на VACV. Исследование подтвердило, что ответы Т-клеток CD8+ были менее продолжительными, чем их аналог CD4+. В то же время авторы наблюдали, что ответы Т-клеток CD4+ человека были связаны с 53% антиген-специфических клеток, секретирующих гранзим В. Предыдущие исследования на макаках показали, что Т-клетки CD4+ обеспечивают большую защиту от инфекций VACV и MPXV, чем Т-клетки CD8+. Текущие данные, добавленные к предыдущим выводам, предположили их роль в поддержке развития ответов антител. Было указано, что долговечность и цитотоксический компонент CD4+ T-клеток способствуют устойчивой противовирусной функции CD4+ T-клеток.

Выводы

По словам авторов, это первое исследование, демонстрирующее использование МЧ эпитопов для выявления специфических для оспы Т-клеточных ответов у людей, в частности, специфических для MPXV последовательностей. Этот новый метод устранил все помехи экспрессии поксвируса иммунных антагонистических генов, когда ответы Т-клеток количественно оценивались с использованием инфицированных клеток. В случае с MPXV этот метод также вызвал опасения по поводу биобезопасности. Интересно, что более 60 исследований разработали MP SARS-CoV-2 с использованием аналогичного подхода.

В ходе исследования были выявлены иммунодоминантные перекрестно-реактивные ORF для генерации MP для измерения ответов Т-клеток, что принесло пользу исследовательскому сообществу. Средняя степень сохранения аминокислотной последовательности составляла от 61 до 67%, что означает, что ответы Т-клеток, индуцированные вакцинацией против ВОВ, должны распознавать ортологичные белковые последовательности в геноме MPXV. Исследование позволило разработать МП, которые могли бы экспериментально обнаруживать VACV-специфические Т-клеточные ответы и перекрестно-реактивные Т-клетки MPXV у людей, вакцинированных Dryvax, что в будущем могло бы облегчить мониторинг клеточного иммунитета после инфекции MPXV и вакцинации. Кроме того, данные исследования могут помочь оценить конкретные области, сохранившиеся у нескольких видов OPXV, включая MPXV, для разработки вакцины.

*Важное замечание

bioRxiv публикует предварительные научные отчеты, которые не рецензируются экспертами и, следовательно, не должны рассматриваться как окончательные, направляющие клиническую практику/поведение, связанное со здоровьем, или рассматриваться как установленная информация.