идеи из отраслиДэниел ШифферТехнический директорДеНовикс

Интервью с Дэниелом Шиффером, директором по технологиям DeNovix

Почему в настоящее время ячейки подсчитываются со слайдами? Сколько раз обычно используются слайды и что происходит с ними после использования?

До недавнего времени клетки обычно подсчитывали на многоразовом кварцевом гемоцитометре. С появлением 12-15 лет назад автоматизированных счетчиков клеток широкое распространение получили одноразовые предметные стекла. В первую очередь это был способ для этих счетчиков клеток загружать и подсчитывать слайды. Хотя они удобны для автоматизированных систем, они создают дополнительные текущие расходы для лабораторий, а одноразовый пластик также оказывает значительное воздействие на окружающую среду.

Изображение предоставлено: Shutterstock | Ватипорн Йенчум

Каждый слайд предназначен для использования только один раз. На слайде может быть два счетчика, но все они одноразовые и обычно утилизируются после использования. Мы слышали истории о людях, пытающихся повторно использовать одноразовые слайды; однако производители слайдов не рекомендуют это из соображений точности. Это также значительно увеличивает практическое время, необходимое для подсчета клеток.

Как CellDrop избавляет от одноразовых слайдов? Где хранятся ячейки и как достигается полная очистка между запусками?

Чтобы улучшить эту систему, DeNovix объединил лучшее из старого и нового, заменив пластиковые слайды двумя постоянными сапфировыми поверхностями оптического качества. Поверхности располагаются параллельно друг другу с помощью высокоточного винта, образуя камеру, аналогичную традиционному гемоцитометру. Основная технология адаптирована из наших микрообъемных спектрофотометров серии DS-11, и пользователи сразу же освоятся с рабочим процессом загрузки, измерения и очистки.

Устранить расходы | Автоматизируйте подсчет клеток Play

Исследователи распределяют клетки в камеру, нажимают кнопку подсчета, и анализ выполняется автоматически. После этого образец просто вытирается сухой лабораторной салфеткой, и CellDrop готов к следующему образцу. Одной из замечательных особенностей CellDrop является большой экран высокой четкости с предварительным просмотром измерительной камеры в реальном времени. Это позволяет пользователю мгновенно убедиться, что поверхности чистые.

Изображение предоставлено: DeNovix

Какова производительность по сравнению со счетчиками клеток на слайдах?

В счетчиках на основе слайдов используются пластиковые слайды, которые вносят несоответствия между подсчетами. Например, если у исследователя есть 10 пластиковых слайдов, между каждым из слайдов будет 10 небольших различий. В системе CellDrop используется твердая сапфировая поверхность, которая остается неизменной при каждом использовании, а высота камеры автоматически калибруется при каждом включении прибора.

Это очень воспроизводимый запуск для запуска. Кроме того, подсчет ячеек в CellDrop происходит очень быстро по сравнению с другими автоматическими счетчиками, поэтому пользователь получает реальное повышение производительности.

Изображение предоставлено: DeNovix

С какими приложениями работает CellDrop?

Наши основные приложения в настоящее время связаны с жизнеспособностью клеток, т.е. подсчетом живых/мертвых культур клеток млекопитающих, дрожжей и насекомых. Доступны две модели CellDrop — двойная флуоресценция и светлое поле или только светлое поле.

Для измерения жизнеспособности в светлом поле ученые используют краситель, такой как трипановый синий, для окрашивания клеток. Трипановый синий имеет свои ограничения, поэтому для лабораторий, требующих большей специфичности и точности, а также более широкого спектра применений, мы рекомендуем использовать флуоресценцию. CellDrop может использовать обычные флуорофоры, такие как акридиновый оранжевый и йодид пропидия (AO/PI), где флуоресцентный АО окрашивает живые клетки в зеленый цвет, а PI окрашивает мертвые клетки в красный цвет.

California Gold Nutrition, LactoBif, пробиотики, 30 млрд КОЕ, 60 вегетарианских капсул

Это полностью избавляет от необходимости делать предположения при подсчете живых/мертвых клеток или подсчете первичных клеток в образцах, которые потенциально загрязнены. Например, он позволяет избежать подсчета эритроцитов или других частиц и мусора, которые обычный алгоритм Trypan или ручной подсчет могут спутать с клетками, что приводит к неточному подсчету.

Вы также можете анализировать трансфицированные GFP клетки с помощью CellDrop, определяя процент жизнеспособности и эффективность трансфекции. Платформа предназначена для широкого круга приложений в клеточной биологии, а также в экологической, пищевой и пивоваренной промышленности.

Можно ли использовать CellDrop с опасными и инфекционными образцами?

Есть два способа обращения с опасными или инфекционными образцами с помощью CellDrop. Во-первых, мы разработали его для размещения в шкафу биобезопасности. Исследователи с уровнем биобезопасности 2 или лабораторией уровня биобезопасности 3 могут помещать CellDrop прямо в вытяжку, где они имеют дело с опасными клетками.

Исследования продолжаются в обычном режиме с использованием стандартного протокола очистки CellDrop после подсчета образцов клеток. Например, если для стерилизации оборудования и используемой области используется 10% отбеливатель, его можно распылить на бумажное полотенце, чтобы протереть CellDrop после использования.

Мы также разрешаем использование одноразовых предметных стекол внутри CellDrop для инфекционных или опасных материалов. Если есть образец, который по какой-либо причине лаборатория действительно не хочет напрямую прикасаться к CellDrop, можно использовать ряд слайдов от разных производителей.

В этом случае исследователь клал предметное стекло поверх многоразовой поверхности, затем фокусировался на клетках на предметном стекле, подсчитывал их, а затем выбрасывал в опасные отходы, при этом образец никогда не касался CellDrop.

Какое программное обеспечение и алгоритмы/ИИ поставляются со счетчиком клеток CellDrop? Как они помогают ученым?

Программное обеспечение DeNovix разработано учеными-биологами для ученых-биологов. Мы прилагаем все усилия, чтобы сделать программное обеспечение не только интуитивно понятным в использовании, но и очень мощным. Исследователи могут быстро подсчитывать и анализировать результаты прямо на борту прибора. Приложения для подсчета и все встроенные алгоритмы предварительно установлены на счетчиках CellDrop, поэтому нет необходимости в дополнительных планшетах, компьютерах или облачном программном обеспечении.

В каждое приложение для подсчета мы включили протокол по умолчанию, который хорошо работает для большинства распространенных клеточных линий. Клиенты могут легко оптимизировать настройки для различных типов клеток, а затем сохранять их в протоколах для дополнительных подсчетов. Результаты сохраняются на борту для легкого поиска для повторного анализа или аудита.

Какие ограничения существуют для системы CellDrop?

Система была спроектирована как счетчик клеток. Так что, как и в любом оптическом приборе, существуют ограничения разрешения из-за физики системы. Мы можем надежно подсчитывать клетки на 4 микрона, и действительно нет никаких ограничений по сравнению с тем, что вы можете сделать с помощью ручного подсчета или другого автоматизированного счетчика клеток .

Мы разработали его, чтобы обеспечить лучшее из обоих миров — скорость автоматизации, но без дополнительных затрат и неудобств, связанных с одноразовыми предметными стеклами. Если вам по какой-либо причине нужны одноразовые предметные стекла, CellDrop может удовлетворить это, но это также дает исследователям возможность использовать многоразовую систему для большинства проводимых ими исследований.

Что ждет счетчики клеток DeNovix в будущем?

Мы продолжим расширять приложения и функциональные возможности CellDrop с помощью наших бесплатных обновлений программного обеспечения. Мы тесно сотрудничаем с нашими клиентами и уже имеем несколько отличных идей, которые планируем реализовать.

В более широком смысле DeNovix будет продолжать искать места, где мы можем внедрять инновации, чтобы сэкономить время и деньги клиентов и уменьшить болевые точки в лаборатории. Нам нравится упрощать приборы и предоставлять инструменты, которые ученые хотели бы иметь, но которые не являются экономически эффективными с учетом существующей технологии или необходимости покупать новый поток расходных материалов.

Где читатели могут найти дополнительную информацию?

https://www.denovix.com/celldrop/

О Даниэле Шиффере

Дэн присоединился к NanoDrop Technologies Inc. в 2006 году, когда получил степень бакалавра в области биотехнологии в Университете Делавэра. После участия в разработке NanoDrop 8000 и NanoDrop 2000 Дэн получил должность преподавателя и научного сотрудника в Университете Вилланова.

В Villanova он помог разработать новую систему FRET на основе проточной цитометрии, чтобы выяснить роль организации клеточной мембраны в активации CD4+ T-клеток .

Затем Дэн перешел на должность научного ассистента в Пенсильванский университет, где он проводил высокопроизводительные генетические скрининги, чтобы обнаружить новые пути иммунной системы, которые регулируют патогенез вирусов, переносимых насекомыми, прежде чем присоединиться к DeNovix в 2013 году. Он имеет степень магистра иммунологии Университета Вилланова.

Политика в отношении спонсируемого контента: News-Medical.net публикует статьи и связанный с ними контент, который может быть получен из источников, с которыми у нас есть существующие коммерческие отношения, при условии, что такой контент повышает ценность основного редакционного духа News-Medical.Net, который заключается в обучении и информировании сайта. посетители, интересующиеся медицинскими исследованиями, наукой, медицинскими приборами и методами лечения.