В недавнем исследовании, опубликованном на сервере препринтов bioRxiv *, исследователи из Национального института здравоохранения США продемонстрировали эффективность молнупиравира и нирматрелвира, двух пероральных противовирусных препаратов против коронавируса 2 тяжелого острого респираторного синдрома (SARS-CoV-2) на модели макаки-резус. самый близкий к человеку прокси.

Исследование:  комбинированное лечение молнупиравиром и нирматрелвиром улучшает ингибирующее действие на SARS-CoV-2 у макак-резусов . Кредит изображения: НИАИД

Фон

Нирматрелвир (PF-07321332) и молнупиравир (MK-4482) получили одобрение Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) для использования в качестве монотерапии у пациентов с коронавирусной болезнью 2019 года (COVID-19) высокого риска.

Первый представляет собой ингибитор 3C-подобной протеазы (3CL pro ), который препятствует расщеплению полипротеина SARS-CoV-2, чтобы остановить репликацию. В настоящее время нирматрелвир используется в сочетании с ритонавиром в низких дозах, ингибитором цитохрома P450-3A4, что увеличивает период его полувыведения из сыворотки для повышения его активности. Молнупиравир (МК-4482), с другой стороны, является аналогом нуклеозида, продаваемым под названием Лагеврио™. Он вызывает катастрофическую скорость мутаций, которая снижает инфекционность потомков SARS-CoV-2.

Хотя доступны доклинические данные исследований на моделях грызунов и хорьков, клинические исследования не оценивали эти два препарата в комбинации, которая, согласно некоторым предыдущим исследованиям, улучшает их индивидуальные ингибирующие эффекты.

Об исследовании

В настоящем исследовании исследователи оценили эффективность MK-4482 и PF-07321332 в качестве монотерапии и в комбинации против инфекции вызывающим озабоченность дельта-вариантом SARS-CoV-2 (VOC) на модели макаки-резус. В каждой группе было пять животных, которые получали семь обработок через пероральный желудочный зонд каждые 12 часов, через 12 часов после заражения (hpi) средней инфекционной дозой 2×10 6 для культуры тканей (TCID 50 ) Delta VOC. Животные получали либо носитель, либо 130 мг/кг MK-4482, либо 20 мг/кг PF-073211332 с 6,5 мг/кг ритонавира, либо комбинацию из одинакового количества всех трех соединений.

Исследователи усыпили животных через четыре дня после заражения (dpi) для сбора и анализа тканей. Затем они использовали оценочную таблицу для оценки животных на наличие признаков болезни еще до инокуляции (нулевое число точек на дюйм). Они присваивали баллы от нуля до 15 ежедневно за внешний вид, кожу, мех, голову, нос, глаза, рот, дыхание, фекалии и мочу, потребление пищи и двигательную активность. Наконец, исследователи выполнили анализ площади под кривой (AUC) для совокупного измерения существенных различий между тремя исследуемыми группами.

Результаты исследования

Животные в группе, получавшей носитель, имели самые высокие баллы, достигающие максимума при двух днях на дюйм, в то время как животные, получавшие комбинированное лечение, имели самые низкие баллы.

Анализ AUC показал значительную разницу между группой, получавшей носитель, и группой, получавшей комбинированную терапию. Например, результаты полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) на основе субгеномного E(sgE), которая указывала на активную репликацию SARS-CoV-2, показали более низкие инфекционные вирусные титры при одном дне на дюйм во всех группах, получавших лечение, по сравнению с группой, получавшей носитель. -леченная группа. Кроме того, содержание вирусной РНК sgE в мазках из носа оставалось значительно ниже в группе комбинированной терапии на протяжении всего исследования.

Анализ AUC бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ) также выявил значительную разницу между группами, получавшими носитель, и группами, получавшими комбинированное лечение. Инфекционные вирусные титры в образцах БАЛ были ниже во всех группах лечения через один и два dpi по сравнению с группой, получавшей носитель. Кроме того, эффект комбинированной терапии был значительно ниже, чем у контрольной группы, получавшей носитель, при одном дне на дюйм.

Кроме того, животные, получавшие PF-07321332 и комбинированную терапию, имели более низкие уровни вирусной нагрузки sgE рибонуклеиновой кислоты (РНК) в легких. Однако при четырех днях на дюйм инфекционные вирусные титры в легких уменьшились во всех группах лечения. Комбинированная терапия также уменьшила пневмонию: только у одного из пяти животных были обнаружены минимальные поражения в двух долях легкого.

В то время как 800 мг перорального молнупиравира назначали два раза в день в течение пяти дней после появления симптомов, 300 мг нирматрелвира перорально назначали два раза в день вместе со 100 мг ритонавира. Кроме того, исследователи оценивали уровни каждого фармацевтически активного соединения в плазме в каждой клинически значимой точке исследования перед введением дозы и в гомогенатах легких при вскрытии. Эти оценки подтвердили наличие лекарственного средства на желаемом уровне и гарантировали отсутствие какого-либо непредвиденного лекарственного взаимодействия между двумя видами лечения. Примечательно, что комбинированная схема лечения не оказывала негативного влияния на уровни каждого активного препарата.

Результаты исследования также показали, что комбинированная терапия молнупиравиром и нирматрелвиром может противодействовать эффекту рикошета, способствуя более короткому пятидневному режиму лечения. Кроме того, это может снизить вероятность ускользания вируса, как это наблюдается для других склонных к мутациям вирусов, таких как вирус гепатита С.

Вывод

В целом, текущее исследование подчеркнуло необходимость постоянного улучшения режимов дозирования существующих лекарств от COVID-19, включая молнупиравир и нирматрелвир. На фоне продолжающегося появления и селекции вариантов SARS-CoV-2 (на данный момент идентифицировано 13) все методы лечения моноклональными антителами и современные вакцины против SARS-CoV-2 терпят неудачу, потому что основанный на белке вирусный шип (S), который продолжает мутировать по мере SARS-CoV-2 эволюционирует. Однако MK-4482 и PF-07321332 работают независимо от S-белка SARS-CoV-2 и целевых полимеразы и протеазы SARS-CoV-2 соответственно.

Кроме того, принцип действия как МК-4482, так и ПФ-07321332 дискретный; таким образом, комбинированная терапия может обеспечить потенциальную пользу по сравнению с монотерапией. Кроме того, модель макаки-резуса хорошо переносила комбинированное введение препаратов МК-4482 и ПФ-07321332 без побочных реакций, о чем свидетельствовали клиническое наблюдение, биохимический и гематологический анализы крови.

*Важное замечание

bioRxiv публикует предварительные научные отчеты, которые не рецензируются экспертами и, следовательно, не должны рассматриваться как окончательные, направляющие клиническую практику/поведение, связанное со здоровьем, или рассматриваться как установленная информация.