В недавнем исследовании, опубликованном в Журнале клинических исследований , исследователи определили реакцию Т-клеток на NVX-CoV2373, адъювантную рекомбинантную полноразмерную вакцину с шиповидным тримером белка тяжелого острого респираторного синдрома 2 (SARS-CoV-2).

Фон

Т-клетки, способные распознавать эпитопы SARS-CoV-2 у неинфицированных людей, представляют собой перекрестно-реактивные Т-клетки памяти, образующиеся в ответ на инфекции широко циркулирующими коронавирусами человека (HCoV) (например, OC43, HKU1). Поскольку эти перекрестно-реактивные кластеры памяти дифференцировки (CD)4+ Т-клеток могут влиять на ответ на вакцинацию против коронавирусной болезни 2019 (COVID-19), исследователи измерили ответы CD4+ и CD8+ Т-клеток на вакцину NVX-CoV2373.

NVX-CoV2373 имеет разрешение на использование в чрезвычайных ситуациях (EUA) в нескольких странах. Кроме того, он продемонстрировал эффективность в клинических испытаниях фазы IIb и III в Соединенном Королевстве (Великобритания), Южной Африке, США (США) и Мексике. Это рекомбинантная белковая вакцина, которая образует наночастицы размером примерно 30 нм на основе гидрофобного взаимодействия с сердцевиной мицеллы полисорбата-80. Антиген NVX-CoV2373 составлен с адъювантом Matrix-M и использует стабилизированный гомотример белка S до слияния предкового штамма Wuhan-Hu-1 SARS-CoV-2. Поскольку эта вакцина стабильна при температуре от 2°C до 8°C, ее можно хранить и транспортировать в страны с ограниченной холодильной инфраструктурой, что расширяет доступ к вакцине для их населения.

На фоне появления новых вариантов SARS-CoV-2 с большей инфекционностью более детальное понимание иммунного ответа на NVX-CoV2373 может помочь в продолжающихся усилиях по борьбе с COVID-19.

Об исследовании

В настоящем исследовании исследователи собрали мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC) у людей, которые получили 5 мкг NVX-CoV2373 во время клинических испытаний фазы I/IIa в Австралии и США. В группу I фазы были включены лица в возрасте от 18 до 59 лет, с добавлением страты в возрасте от 60 до 84 лет на фазе II. В частности, пять добровольцев были вакцинированы 5 мкг NVX-CoV2373 в 0-й день и плацебо в 21-й день. Команда изолировала четырех реципиентов плацебо в 0-й, 7-й и 28-й дни. 7, который получил дозу плацебо на 21-й день слепым методом. Исследователи измерили S-специфические CD4+ T-клетки SARS-CoV-2 с помощью анализа активационно-индуцированного маркера (AIM).

Кроме того, они применили внутриклеточное цитокиновое окрашивание (ICS) для идентификации S-специфических циркулирующих фолликулярных хелперных Т-клеток (cTfh), что помогло им оценить функциональность индуцированных NVX-CoV2373 S-специфических ответов CD4+ T-клеток (например, выработка цитокинов). Кроме того, исследователи изучили взаимосвязь между ответами Т-клеток и антител после вакцинации NVX-CoV2373. Они оценили титры IgG с помощью иммуноферментного анализа (ELISA) и активность нейтрализации SARS-CoV-2. Наконец, команда использовала микронейтрализацию и анализ ингибирования связывания человеческого ангиотензинпревращающего фермента 2 (hACE2) для анализа титров анти-S-антител.

Результаты исследования

Вакцинация NVX-CoV2373 индуцировала SARS-CoV-2 S-специфический CD4+ Т-клеточный ответ уже через семь дней после первой вакцинации, как было измерено с помощью анализа AIM. Эта быстрая индукция устойчивых Т-клеточных ответов может быть связана с повышенной иммуногенностью адъюванта Matrix-M в вакцине NVX-CoV2373. Этот адъювант может быть более эффективным, чем большинство адъювантов, в отношении индукции примирования CD8+ Т-клеток или отзыва перекрестно-реактивных Т-клеток памяти. Он содержит амфифильные сапонины, которые дестабилизируют эндосомальные/лизосомальные мембраны и облегчают проникновение вакцинных антигенов в цитоплазму. Это первый решающий шаг в цитозольном катаболизме и последующем представлении молекул основного класса гистосовместимости I (MHC класса I) для инициации ответов CD8+ Т-клеток.

Эти ответы Т-клеток характеризовались значительной популяцией cTfh. Сильный, быстрый и устойчивый клеточный ответ cTfh через семь дней после первой вакцинации, вероятно, подтверждает идею о более эффективном ответе антител. Однако авторы не наблюдали всплеска шкалы ответа Т-клеток между моментами времени первой и второй вакцинации. Точно так же эти клетки имели полифункциональные клетки, продуцирующие цитокины, в которых преобладали клетки, продуцирующие интерферон-гамма (IFN-γ), фактор некроза опухоли-альфа (TNF-α) и интерлейкин 2 (IL-2). Примечательно, что у подмножества доноров также наблюдались ответы CD8+ Т-клеток, запускаемые NVX-CoV2373.

Авторы отметили, что, хотя ответы CD4+ и CD8+ Т-клеток коррелировали друг с другом после первого и второго раундов вакцинации, всего; AIM+ обнаружил CD4+ T-клетки, коррелирующие с титрами нейтрализующих антител. Кроме того, данные о цитокинах показали, что вакцина NVX-CoV2373 индуцировала ответ T-хелперов 1 (Th1) CD4+ T-клеток, как сообщалось ранее в других исследованиях. Предыдущие исследования на животных моделях сообщали об аналогичном смещении Th1 в присутствии вакцин с адъювантом Matrix-M. Цитокиновые ответы увеличились после второй вакцинации, при этом увеличение полифункциональности сохранялось после второй дозы, что указывает на большую поляризацию ответа CD4+ Т-клеток.

Выводы

Белковые субъединичные вакцины были слабыми индукторами ответов CD8+ Т-клеток у людей. Тем не менее, данные исследования показали, что вакцина NVX-CoV2373 индуцировала умеренные ответы S-специфических CD8+ T-клеток SARS-CoV-2 у части участников. Результаты ICS дали аналогичные результаты: IFN-γ+ CD8+ T-клетки были обнаружены после двух раундов вакцинации NVX-CoV2373.

Несмотря на меньшую полифункциональность, у нескольких доноров развился многофункциональный ответ CD8+ Т-клеток после вакцинации NVX-CoV2373. Поскольку S-специфические ответы CD8+ T-клеток коррелировали с ответами CD4+ T-клеток, наблюдаемый ответ CD8+ T-клеток, вероятно, зависел от ответа CD4+ T-клеток. Для подтверждения результатов исследования необходимы дальнейшие исследования с более крупными когортами серопозитивных и серонегативных вакцинированных.